CRISPR/Cas9技术,是近年来出现的高效的基因组定点编辑技术,主要是基于细菌的一种获得性免疫系统改造而成,其特点是制作简单、成本低、作用高效。
工作原理是crRNA (CRISPR-derived RNA) 通过碱基配对与 tracrRNA (trans-activating RNA) 结合形成 tracrRNA/ crRNA 复合物,此复合物引导核酸酶Cas9蛋白在与crRNA 配对的序列靶位点处剪切双链 DNA,从而实现对基因组DNA序列进行编辑,而通过人工设计这两种 RNA,可以改造形成具有引导作用的gRNA (guide RNA),足以引导Cas9对DNA的定点切割,是目前被认为最有效的基因改造工具和极有可能想临床用的基因治疗技术之一。
CRISPR/Cas9方法构建的基因突变动物具有显著高于传统方法的生殖系转移能力,是一种可靠、高效、快速的构建敲除动物模型的新方法。
服务描述:
通过碱基配对与 tracrRNA (trans-activating RNA )结合形成 tracrRNA/crRNA 复合物,此复合物引导核酸酶 Cas9 蛋白在与 crRNA 配对的序列靶位点剪切双链 DNA。而通过人工设计这两种RNA,可以改造形成具有引导作用的sgRNA(singleguide RNA ),足以引导 Cas9 对 DNA 的定点切割。
CRISPR/Cas9技术实验步骤:
