Author:
转自 实验万事屋
Release time:
2018
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07
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09
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Hello,大家好,我是贫穷激发创造力的科研鳖,最近做了一批transwell,从预实验到染出还能看的东西着实费了一番心思,但是最后分析数据的时候常用的平台都没有什么好贴。万幸小鳖我斥巨资购买的VPN让我从油管里看到了希望,加上自己的改进,觉得还挺靠谱,分享给亲们~一、首先安装image J + file-openwindows用户直接安,IOS的老铁们先安装个JAVA环境(从JAVA官网就能下来),再安装image J(从官网也能下来)。总的来说还是一劳永逸的,不算很麻烦,我们科研都做了还怕什么麻烦,使用方法不管哪个版本都差不多。打开图片这种老年人操作就不用介绍了吧……不好意思桌面有点乱……二、将图片转换成黑白如图所示,image-type-8-bit三、调整阈值image-adjust-threshold打开调整界面,把原图放在一边,边调节画圈的位置边看着原图,以防用力过猛或隔靴搔痒。上下两个数可以是0/128或28/76什么的,看起来细胞尽量都黑了,背景也比较白就差不多了,不用苛求两个数非得是多少。还要调到B&W,Dark background。都好了之后按apply,就可以关掉阈值界面了~四、分割上一张图所有接触的细胞还都是一片,这么计数肯定会少,所以这一步用watershed把连在一起的细胞分开。process-binary-watershed,细胞被分开了吧五、分析数量analyze-analyze particles打开分析窗口我的重要创新点就是这个调整大小,从0.005开始算起,否则脏的背景也要被计算进去了(0.005也不是绝对的,可以适当调整,根据照片质量不同,我在计数的时候也用过0.008,0.01,0.015不等)。勾选show outlines, display results,选好了之后点OK六、结果展示嗒哒~软件说这一张皂片有...