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Release time: 2017 - 07 - 22
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每当要搞从未做过的实验时,总会抓狂,到哪找 Protocol 呢?别急,下面让我们一起开启寻找 protocol 之旅。一.搜索引擎不过多解释,想要在网上找东西,就靠 Google。在此给出一点建议:多用 Google.com,多搜英文关键词。推荐搜索引擎:Google.com, Bing.com二.权威Protocol 网站网上有许多专门以 protocol 为主的网站,现举例最有名的:1. Nature Protocol重点推荐「Discussion Forum」「Tools & Reagents」「Featured Movies」专区。有讨论组,有常用试剂配方,还有特色的实验视频,强烈推荐。2. Cold Spring Harbor Protocols3. Springer ProtocolsSpringer Protocol 最大的优势,就是可以在线管理属于自己的Protocol,而且其中很多实验方法,多来自经典实验参考书 Methods 系列。三.生物 / 医学实验视频JoVE 全称 Journal of Visualized Experiments,该网站是专门收集实验操作和视频的学术网站。觉得看 Protocol 很枯燥的同学,可以考虑看看这个。四.「生物学霸」微信公众号是的,你没看错,通过公众号就可以搞定,随时随地轻松召唤 Protocol,只需在生物学霸公众号后台回复「q+实验关键词」即可。举个栗子,比如「qdna 提取」实验:这里不仅有 Protocol,还可以查看实验心得,与做同一实验的同学们一起探讨实验中出现的问题。
Author: 转自 实验万事屋
Release time: 2018 - 07 - 09
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Hello,大家好,我是贫穷激发创造力的科研鳖,最近做了一批transwell,从预实验到染出还能看的东西着实费了一番心思,但是最后分析数据的时候常用的平台都没有什么好贴。万幸小鳖我斥巨资购买的VPN让我从油管里看到了希望,加上自己的改进,觉得还挺靠谱,分享给亲们~一、首先安装image J + file-openwindows用户直接安,IOS的老铁们先安装个JAVA环境(从JAVA官网就能下来),再安装image J(从官网也能下来)。总的来说还是一劳永逸的,不算很麻烦,我们科研都做了还怕什么麻烦,使用方法不管哪个版本都差不多。打开图片这种老年人操作就不用介绍了吧……不好意思桌面有点乱……二、将图片转换成黑白如图所示,image-type-8-bit三、调整阈值image-adjust-threshold打开调整界面,把原图放在一边,边调节画圈的位置边看着原图,以防用力过猛或隔靴搔痒。上下两个数可以是0/128或28/76什么的,看起来细胞尽量都黑了,背景也比较白就差不多了,不用苛求两个数非得是多少。还要调到B&W,Dark background。都好了之后按apply,就可以关掉阈值界面了~四、分割上一张图所有接触的细胞还都是一片,这么计数肯定会少,所以这一步用watershed把连在一起的细胞分开。process-binary-watershed,细胞被分开了吧五、分析数量analyze-analyze particles打开分析窗口我的重要创新点就是这个调整大小,从0.005开始算起,否则脏的背景也要被计算进去了(0.005也不是绝对的,可以适当调整,根据照片质量不同,我在计数的时候也用过0.008,0.01,0.015不等)。勾选show  outlines, display results,选好了之后点OK六、结果展示嗒哒~软件说这一张皂片有...
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